بیان، تخلیص و آنتی ژنیسیته فیوژن پروتئین نوترکیب ureb229-561-hpaa هلیکوباکتر پیلوری
thesis
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس
- author بهاره حاجی خانی
- adviser شهین نجار پیرایه زهیر حسن
- Number of pages: First 15 pages
- publication year 1389
abstract
هلیکوباکتر پیلوری یک باکتری مارپیچی، میکروآئروفیل و گرم منفی است که مخاط معده و دئودنوم انسان ها را کلونیزه می کند. در این محل ها باکتری موجب بروز گاستریت مزمن و اولسر پپتیک می گردد. عفونت هلیکوباکتر پیلوری همچنین با ایجاد لنفوم بافت لنفاوی مرتبط با مخاط و سرطان معده ارتباط دارد. رژیم های درمانی آنتی بیوتیکی رایج به همراه یک مهار کننده پمپ پروتون مشکلاتی را چون هزینه بالا، عدم همکاری و پذیرش بیمار، افزایش مقاومت های آنتی بیوتیکی، عود و رویداد عفونت مجدد در پی دارد. واکسیناسیون به عنوان یک راهکار جایگزین و یا مکمل درمان دارویی به منظور پاکسازی هلیکوباکتر پیلوری مطرح می باشد. در این مسیر بسیاری از فاکتورهای بیماریزایی باکتری و پاسخ های ایمنی القا شده توسط آنها مورد بررسی قرار گرفته است. هدف از مطالعه حاضر تهیه یک فیوژن پروتئین نوترکیب حاوی قطعه ای از زیر واحد بتای آنزیم اوره آز باکتری (ureb229-561) و ادهـزین a هلیکوباکتر پیلوری (hpaa) و نیز بررسی پاسخ های ایمنی نسبت به آن به عنوان کاندیدایی مناسب جهت ادامه تحقیقات در مسیر تهیه واکسن می باشد. ژنهای کد کننده پروتئین های مذکور از ژنوم سویه استاندارد هلیکوباکتر پیلوری به روش pcr جدا شده و با هضم آنزیمی به داخل وکتور pet28a وارد شدند. سپس به داخل میزبانهای کلونینگ و بیان ترنسفورم و سپس بیان شدند. علاوه بر این واکنش پذیری ایمنی پروتئین های نوترکیب نیز توسط وسترن بلات پس از خالص سازی به روش کروماتوگرافی تمایلی توسط رزین نیکل بررسی گردید. آزمایش های هضم آنزیمی، pcr و تعیین سکانس نشان دادند که ژن های مورد بررسی به درستی در وکتور کلون شده اند. نتایج sds-page نیز صحت بیان پروتئین ها را تائید نمود. در مرحله بعد پاسخ های ایمنی به این فیوژن پروتئین نوترکیب و همچنین هر یک از پروتئین ها بطور جداگانه در موش های balb/c بررسی شد. تلقیح زیر جلدی پروتئین ها موجب تحریک قابل توجه پاسخ های ایمنی در موش گردید که با تولید آنتی بادی های اختصاصی هلیکوباکتر پیلوری از جمله iga ترشحی و igg1 و igg2a سرمی و همچنین افزایش تولید سایتوکاین های ifn-? و il-4 همراه بود که وجود همزمان پاسخ های th1 و th2 را نشان می داد. این اثرات در حالت فیوژن بیشتر از هر یک از پروتئین ها به تنهایی بود (p<0.001). در واقع نتایج این تحقیق نشان داد که فیوژن پروتئین ureb229-561-hpaa بطور موثری قادر به برانگیختن پاسخ های ایمنی مختلف می باشد. همچنین قطعات آنتی ژنیک پروتئینی می توانند به جای پروتئین کامل در تولید واکسن های چند ظرفیتی به کار روند.
similar resources
کلون، بیان، تخلیص و بررسی آنتی ژنیسیته نواحی آنتی ژنیک پروتئین vaca هلیکوباکتر پیلوری
زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری شایع ترین باکتری است که جوامع انسانی را در بعد جهانی مبتلا به عفونت ساخته است. ژن vaca از مهمترین شاخص های بیماری زایی این باکتری می باشد که باعث تشکیل واکوئل های اسیدی در سیتوپلاسم سلول و تخریب سلول های اپیتلیال معده می شود. هدف از این مطالعه بیان بالا و بررسی خواص آنتی ژنیک پروتئین نوترکیب vaca هلیکوباکتر پیلوری در سرم انسان و موش آلوده با هدف طراحی واکسن علیه ه...
15 صفحه اولکلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب فیوژن tat-nef ویروس hiv-۱ در سیستم بیانی پروکاریوتی
زمینه و هدف: یکی از پروتئین های مهم ویروس hiv-1 به نام nef نقش مهمی در چرخه تکثیر ویروس و پیشرفت بیماری ایدز دارد و القای پاسخ ایمنی بر ضد آن می تواند تا حدی عفونت ویروسی را مهار نماید. به علاوه، بخشی از ناحیه پروتئین فعال کننده رونویسی (tat، اسید آمینه های 48 تا 60) از ویروس hiv توانسته است به عنوان یک پپتید نفوذ کننده سلولی (cpp) عمل نماید. در این تحقیق، برای اولین بار کلونینگ و بیان فیوژن ta...
full textتولید پروتئین نوترکیب caga هلیکوباکتر پیلوری
زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری باسیلی گرم منفی است که موجب بیماری های معده و دئودنوم در انسان میشود. از مهمترین ژنهای مرتبط با بیماری زایی این باکتری ژن caga میباشد که موجب کلونیزاسیون بیشتر آن در سلولهای اپی تلیال معده و ایجاد التهاب و زخم های گوارشی میگردد. در این تحقیق سعی گردید تا تولید پروتئین نوترکیب حاوی ناحیه دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک caga در باکتری e. coli انجام گیرد. مواد و روش ه...
full textتخلیص بتالاکتوگلوبولین از شیر گاو و مطالعه آنتی ژنیسیته آن
Beta-lactoglobulin (BLG) is a major whey protein in the milk of ruminants, e.g. cows, and such non-ruminants as horses. This protein is resistant under various conditions of pH and temperature. There is some evidence of absorption of some intact BLG in humans. Infants being fed with cow’...
full textهمسانه‌سازی، بیان و تخلیص انتهای کربوکسیل زیرواحد C آنزیم اوره‌آز هلیکوباکتر پیلوری به منظور تولیدIgY در زرده تخم مرغ
سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری (H.pylori) نوعی باکتری گرم منفی اسپیرال و میکروآیروفیل است که در لایه مخاطی معده انسان تکثیر و ایجاد عفونت می نماید. رویکردهای جدید در جهت بکارگیری درمان های اختصاصی نظیر ایمنوتراپی برای ریشه کنی این عفونت میباشند. آنزیم اوره آز یکی از مهمترین عوامل بیماری زا و آنتی ژنیک این باکتری است. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ابتدا بخش انتهای کربوکسیل زیر واحد C اوره آز، ...
full textآماده‌سازی نانوذرات تری‌متیل کیتوزان حامل پروتئین فعال کننده نوتروفیلی نوترکیب از هلیکوباکتر پیلوری
Background and purpose: Breast cancer is one of the leading causes of death in women around the world with a very high degree of mortality and morbidity. Conventional treatments use cytotoxic drugs which have high levels of side effects, affecting the patient’s quality of life. Therefore today’s pharmacology is looking into treatments with low side effects and maximum efficiency. The helicobact...
full textMy Resources
document type: thesis
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس
Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023